14.(11分)(2014·江蘇，30)為了獲得β-胡蘿卜素產(chǎn)品，某小組開展了產(chǎn)β-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實(shí)驗(yàn)。 請回答下列問題：

　　(1)實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是__________;為了減少滅菌后器皿被污染，滅菌前應(yīng)該____________。

　　(2)為了篩選出酵母菌，培養(yǎng)基中添加了青霉素，其目的是____________________。

　　(3)右圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖，圖中甲、乙、丙指示的依次是________。 (填序號)

　�、侔踩�閥、放氣閥、壓力表

　�、诜艢忾y、安全閥、壓力表

　�、郯踩�閥、放氣閥、溫度表

　�、芊艢忾y、安全閥、溫度表

　　(4)為了將分離到的菌株純化，挑取了菌落在3塊相同平板上劃線，結(jié)果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見菌生長，最可能的原因是________________________。

　　(5)為增加β-胡蘿卜素提取量，在研磨酵母細(xì)胞時，添加石英砂的目的是___________;研磨時________(填“需要”或“不需要”)添加CaCO3，理由是_____________。

　　[答案]　(1)干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)

　　用牛皮紙(報紙)包扎器皿

　　(2)抑制細(xì)菌(放線菌)生長

　　(3)①

　　(4)接種環(huán)溫度過高，菌被殺死

　　(5)有助于研磨充分　不需要　β-胡蘿卜素較耐酸

　　[解析]　(1)對玻璃器皿常用的滅菌方法是干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)法;用牛皮紙包扎玻璃器皿可有效防止滅菌后的物品被環(huán)境中雜菌污染。

　　(2)青霉素是一種廣譜抗生素，通過抑制肽聚糖的形成而抑制細(xì)胞壁的形成從而抑制細(xì)菌(放線菌)的繁殖、生長。酵母菌是真菌，其細(xì)胞壁的成分是幾丁質(zhì)，添加青霉素的培養(yǎng)基對酵母菌的繁殖沒有影響，從而篩選出酵母菌。

　　(3)圖示中的甲為安全閥，乙為放氣閥，丙為氣壓表。

　　(4)在將分離得到的菌株純化，一般采用劃線法和涂布平板法，在應(yīng)用劃線法取菌種時，應(yīng)先將接種環(huán)灼燒滅菌，冷卻后再提取菌種，否則會因接種環(huán)溫度過高而將菌種殺死，使實(shí)驗(yàn)失敗。

　　(5)在提取胡蘿卜素是，研磨時添加石英砂，是為了使細(xì)胞研磨充分，胡蘿卜素充分釋放;研磨時，不需要添加CaCO3，因?yàn)棣乱缓�蘿卜素較耐酸性環(huán)境，不需要加入CaCO3來保護(hù)胡蘿卜素結(jié)構(gòu)不被破壞。

　　15.(10分)(2014·海南，30)已知泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時間有關(guān)。為了測定不同泡制天數(shù)泡菜中亞硝酸鹽的含量，某同學(xué)設(shè)計(jì)了一個實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)材料、試劑及用具包括：刻度移液管、比色管、不同濃度的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液、亞硝酸鹽的顯色劑、不同泡制天數(shù)的泡菜濾液等。

　　回答相關(guān)問題：

　　(1)請完善下列實(shí)驗(yàn)步驟：

　�、贅�(biāo)準(zhǔn)管的制備：用________和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標(biāo)準(zhǔn)管。

　�、跇悠饭艿闹苽洌河每潭纫埔汗芊謩e吸取一定量的________，加到不同的比色管中，然后在各個比色管中加入等量的顯色劑進(jìn)行顯色，得到樣品管。

　�、蹖⒚總�________分別與系列標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行比較，找出與樣品管顏色深淺________的標(biāo)準(zhǔn)管，該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中亞硝酸鹽含量，記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量。

　　(2)下圖表示的是泡菜中________趨勢。

　　(3)泡菜制作過程中產(chǎn)酸的細(xì)菌主要是________(填“醋酸桿菌”或“乳酸菌”)。

　　[答案]　(1)①亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液

　　②不同泡制天數(shù)的泡菜濾液

　�、蹣悠饭堋∽钕嘟�(其他合理答案也給分)

　　(2)亞硝酸鹽含量隨泡制時間的變化趨勢(其他合理答案也給分)

　　(3)乳酸菌

　　[解析]　(1)亞硝酸鹽可與顯色劑發(fā)生顏色反應(yīng)，根據(jù)顏色的深淺可確定亞硝酸鹽的含量多少。用不同濃度的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液與顯色劑可制成顏色深淺不同的系列標(biāo)準(zhǔn)管，不同顏色深淺對應(yīng)的亞硝酸鈉濃度是已知的;用不同泡制天數(shù)的泡菜濾液與顯色劑反應(yīng)，制備一系列的樣品管，將樣品管的顏色與標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行顏色比對，找到與樣品管顏色深淺最接近的標(biāo)準(zhǔn)管，所對應(yīng)的亞硝酸鈉濃度即可代表樣品管中的亞硝酸鹽含量。

　　(2)圖示曲線橫軸為時間，縱軸為亞硝酸鹽含量，該曲線表示泡菜中亞硝酸鹽含量隨發(fā)酵時間的變化趨勢。

　　(3)泡菜制作的原理是乳酸發(fā)酵，產(chǎn)酸的細(xì)菌主要是乳酸菌。

　　16.(11分)(2014·新課標(biāo)Ⅰ，39)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列問題：

　　(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將________分解成________。

　　(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時，CR可與纖維素形成________色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的________。

　　(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表)：

　　酵母膏 無機(jī)鹽 淀粉 纖維

　　素粉 瓊脂 CR溶液 水 培養(yǎng)基甲 + + + + - + + 培養(yǎng)基乙 + + + - + + + 注：“+”表示有，“-”表示無。

　　據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是____________________;培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是__________________________________。

　　[答案]　(1)纖維二糖　葡萄糖　(2)紅　透明圈

　　(3)不能　液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落　不能　培養(yǎng)基中沒有纖維素，不會形成CR-纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌。

　　[解析]　(1)纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是含量最豐富的多糖類物質(zhì)，能被土壤中某些微生物分解利用;分解纖維素的纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即CX酶、C1酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。(3)根據(jù)有無瓊脂成分，可推知，培養(yǎng)基甲為液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基乙為固體培養(yǎng)基;纖維素分解菌分離和鑒別要用固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基甲不符合要求;培養(yǎng)基乙不含纖維素粉，不能形成特定的紅色復(fù)合物，乙培養(yǎng)基不符合要求。