四、是非題
1.分子病都是遺傳病。
2.一個蛋白質(zhì)樣品,在某一條件下用電泳檢查,顯示一條帶,因此說明,該樣品是純的。
3.蛋白質(zhì)的SDS聚丙烯酰氨凝膠電泳和圓盤電泳是兩種完全不同的技術(shù)。
4.等電點不是蛋白質(zhì)的特征參數(shù)。
5.在蛋白質(zhì)和多肽分子中,連接氨基酸殘基的共價鍵除肽鍵外,還有就是二硫鍵。
6.蛋白質(zhì)在小于等電點的pH溶液中,向陽極移動,而在大于等電點的pH溶液中,將向陰極移動。
7.電泳和等電聚焦都是根據(jù)蛋白質(zhì)的電荷不同,即酸堿性質(zhì)不同的兩種分離蛋白質(zhì)混合物的方法。
8.天然存在的氨基酸就是天然氨基酸。
9.用紙電泳法分離氨基酸主要是根據(jù)氨基酸的極性不同。
10.在天然氨基酸中只限于α-NH2能與亞硝酸反應(yīng),定量放出氮氣。
11.由于靜電作用,在等電點時氨基酸溶解度最小。
12.氨基酸在水溶液中或在晶體狀態(tài)時都以兩性離子形式存在。
13.兩性離子氨基酸在溶液中,其正負離子的解離度與溶液pH無關(guān)。
14.氨基酸的等電點可以由其分子上解離基團的解離常數(shù)來確定。
15.溶液的pH可以影響氨基酸的pI值。
16.天然蛋白質(zhì)α-螺旋為右手螺旋。
17.多肽鏈能否形成α-螺旋及螺旋是否穩(wěn)定與其氨基酸組成和排列順序直接有關(guān)。
18.具有四級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì),當(dāng)它的每個亞基單獨存在時仍能保持蛋白質(zhì)原有的生物活性。
19.滲透壓法、超離心法、凝膠過濾法及聚丙烯酰胺凝膠電泳法都是利用蛋白質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)來測定蛋白質(zhì)分子量的。
20.蛋白質(zhì)的變性是蛋白質(zhì)分子立體結(jié)構(gòu)被破壞,因此常涉及肽鍵的斷裂。
21.當(dāng)某一蛋白質(zhì)分子的酸性氨基酸殘基數(shù)目等于其堿性氨基酸殘基數(shù)目時,此蛋白質(zhì)的等電點為7.0。
22.一般說來,蛋白質(zhì)在水溶液中,非極性氨基酸殘基傾向于埋在分子的內(nèi)部而不是表面。
23.蛋白質(zhì)中一個氨基酸殘基的改變,必定引起蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的顯著變化。
24.在每一種蛋白質(zhì)多肽鏈中,氨基酸殘基排列順序都是一定的,而不是隨機的。
25.蛋白質(zhì)變性后溶解度降低,主要是因為電荷被中和及水膜被去除所引起的。
26.蛋白質(zhì)變性后,其分子量變小。
27.蛋白質(zhì)的氨基酸順序(一級結(jié)構(gòu))在很大程度上決定它的三維構(gòu)象。
28.蛋白質(zhì)的亞基(或稱亞單位)和肽鏈?zhǔn)峭x詞。
29.氨基酸的等電點是算出來的,同樣蛋白質(zhì)的等電點也可以算出來。
30.所有蛋白質(zhì)都具有一級、二級、三級、四級結(jié)構(gòu)。
31.蛋白質(zhì)構(gòu)象是蛋白質(zhì)分子中的原子繞單鍵旋轉(zhuǎn)而產(chǎn)生的蛋白質(zhì)分子中的各原子的空間排布。因此,構(gòu)象并不是一種可以分離的單一立體結(jié)構(gòu)形式。
32.蛋白質(zhì)中的稀有氨基酸在遺傳上是特殊的,因為它們沒有三聯(lián)體密碼,所有已知稀有氨基酸都是從其前體經(jīng)化學(xué)修飾產(chǎn)生的。
33.當(dāng)氨基酸處于等電點狀態(tài)時,由于靜電引力的作用,氨基酸的溶解度最小,容易發(fā)生沉淀。
34.一氨基一羧基氨基酸pI為中性,因為-COOH和-NH2解離度相同。
35.蛋白質(zhì)分子酰胺平面中除-C=O外,其余的單鍵都能自由旋轉(zhuǎn)。
36.用強酸強堿變性后的蛋白質(zhì)不沉淀。
五、問答題
1.簡述血紅蛋白的結(jié)構(gòu)?其結(jié)構(gòu)與功能有什么關(guān)系?血紅蛋白和氧的結(jié)合受那些因素的影響?
2.有一個肽段,經(jīng)酸水解測定,由四個氨基酸組成。用胰蛋白酶水解成為二個片段,其中一個片段在280納米(nm)有強的光吸收,并且Pauly反應(yīng)和坂口反應(yīng)都是陽性。另一個片段用CNBr作用釋放出一個氨基酸與茚三酮反應(yīng)呈黃色,試寫出這個肽的氨基酸組成及排列順序。
3.有人純化了一個未知肽,其氨基酸組成為:Asp1,Ser1,Gly1,Ala1,Met1,Phe1和lys2,又做了一系列分析,結(jié)果如下:
、臚DNB與之反應(yīng)再酸水解后得DNP-Ala
、埔饶榈鞍酌(CT)消化后,從產(chǎn)物中分出一個純四肽,其組成為:Asp1,Gly1,Lys1,Met1,此四肽的FDNB反應(yīng)降解產(chǎn)物為DNP-Gly
、且鹊鞍酌(T)消化八肽后又可得到組成分別為Lys1,Ala1,Ser1及Phe1,Lys1,Gly1的兩個三肽及一個二肽。此二肽被CNBr處理后游離出自由天冬氨酸。
請列出八肽全順序并簡示你推知的過程。
4.某天然九肽其組成為:Gly2,Phe2,Tyr1,Met1,Asp1,Arg1和Pro1,經(jīng)胰凝乳蛋白酶(CT)水解后可分得一個五肽和一個四肽,四肽的組成為:Phe1,Tyr1,Gly1和Pro1。此九肽的CNBr處理產(chǎn)物再經(jīng)陽離子交換樹脂層析并洗脫得一個組成為Arg1,Phe1和Gly1的三肽,此九肽如經(jīng)胰蛋白酶(T)水解可得Phe,如用FDNB反應(yīng)后再水解測得DNP-Tyr。請寫出這九肽的全順序解析過程。
5.已知一個九肽的氨基酸順序是:Ala-Pro-lys-Arg-Val-Tyr-Glu-Pro-Gly,在實驗室只有氨基酸分析儀,而沒有氨基酸順序測定儀的情況下,如何使用(1)羧肽酶A或B;(2)氨肽酶;(3)2,4二硝基氟苯(FDNB);(4)胰蛋白酶;(5)胰凝乳蛋白酶,來驗證上述肽段的氨基酸順序。
6.比較肌紅蛋白和血紅蛋白的氧合曲線,并加以簡單的說明。
7.大腸桿菌含有2000種以上的蛋白質(zhì),為了分離它所表達的一個外源基因的產(chǎn)物并保持它的活性,常有很大困難。但為了某種目的,請根據(jù)下列要求寫出具體的方法。
、爬萌芙舛炔顒e進行分離。
、评玫鞍踪|(zhì)分子大小進行分離。
、歉鶕(jù)不同電荷進行分離。
、纫灾苽溆性摦a(chǎn)物的抗體進行分離。
、僧a(chǎn)物的濃縮。
⑹純度的鑒定。
8.蛋白質(zhì)變性過程中,有那些現(xiàn)象出現(xiàn)?并舉出三種能引起蛋白質(zhì)變性的試劑。
9.舉一個例子來說明蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)決定于它的氨基酸順序?
10.用什么試劑可將胰島素鏈間的二硫鍵打開與還原?如果要打開牛胰島素核酸酶鏈內(nèi)的二硫鍵,則在反應(yīng)體系中還必須加入什么試劑?蛋白質(zhì)變性時,為防止生成的-SH基重新被氧化,可加入什么試劑來保護?
11.要測定蛋白質(zhì)的二硫鍵位置,需用什么方法?請簡述之。
12.簡述White和Anfinsen進行的牛胰核糖核酸酶(Rnase)變性和復(fù)性的經(jīng)典實驗。這個實驗說明了什么問題?
13.有一條多肽鏈-Pro-Phe-Cys-Lys-Tyr-Val-Ala-Ser-His-,如用胰蛋白酶水解可得幾條肽段?用胰凝乳蛋白酶水解呢?
14.簡述胰島素原的激活過程?
15.一個五肽,經(jīng)完全水解后得到等摩爾數(shù)的Ala、Cys、Lys、Ser、Phe,用苯異硫氰酸(異硫氰酸苯酯)處理后得到PTH-Ser,用胰蛋白酶水解得一個N-末端為Cys的三肽和一個二肽,用胰凝乳蛋白酶水解此三肽得一個Ala及一個二肽,問:
⑴胰蛋白酶水解后得到的三肽的氨基酸組成及順序?
、埔鹊鞍酌杆夂蟮玫降亩牡陌被峤M成?
、谴宋咫牡囊患壗Y(jié)構(gòu)?
16.試計算丙氨酸(PKα-COOH=2.34,PKα-NH3=9.69),谷氨酸(PKα-COOH=2.19,PKα-NH3=9.67,PKR-COOH=4.25)的等電點。
17.把Ser、Ile、Glu、Ala的混合物在含有正丁醇、水和乙酸的溶劑系統(tǒng)中進行單向紙層析,請寫出層析的快慢順序。
18.某蛋白質(zhì)多肽鏈有一些區(qū)段為α-螺旋構(gòu)象,另一些區(qū)段為β-折疊構(gòu)象,該蛋白質(zhì)分子量為240Kda,多肽外形總長為5.06×10-5cm,計算多肽鏈中α-螺旋構(gòu)象占分子長度的百分之多少?
19.球狀蛋白質(zhì)在pH7的水溶液中折疊成一定空間構(gòu)象。這時通常非極性氨基酸殘基側(cè)鏈位于分子內(nèi)部形成疏水核,極性氨基酸殘基位于分子表面形成親水面。問:
、臯al、Pro、Phe、Asp、Lys、Ile和His中哪些氨基酸側(cè)鏈位于分子內(nèi)部?哪些氨基酸側(cè)鏈位于分子外部?
⑵Ser、Thr、Asn和Gln雖然是極性氨基酸,但它們常常位于球狀蛋白質(zhì)的分子內(nèi)部,為什么?
20.多肽鏈片段是在疏水環(huán)境中還是在親水環(huán)境中更利于α-螺旋的形成?為什么?