第十六單元 動(dòng)物源性細(xì)菌

　　動(dòng)物源性細(xì)菌是人畜共患病的病原菌，即由一種病原菌同時(shí)可引起動(dòng)物和人類的某些傳染病，稱為人畜(獸)共患病，其中絕大多數(shù)是以動(dòng)物作為傳染源的稱為動(dòng)物源性疾病(zoonosis)。由于人類直接接觸病畜或其污染物及媒介動(dòng)物叮咬等途徑感染而致病，這些病主要發(fā)生在畜牧區(qū)或自然疫源地。動(dòng)物源性細(xì)菌主要有布魯菌、鼠疫耶氏菌和炭疽芽胞桿菌。

　　第一節(jié) 布魯菌屬

　　布魯 菌屬(Brucella)細(xì)菌是一類人畜共患傳染病的病原菌，有4個(gè)生物種、13個(gè)生物型，因最早由美國(guó)醫(yī)師 David Bruce首先分離出，故得名。本屬使人致病的有牛布魯菌 (B.abortus又稱流產(chǎn)布魯菌)、羊布魯桿菌(B.melitensis)、豬布魯桿菌(B.suis)和犬布魯桿菌(B.canis)，在我國(guó)流行占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)的是羊布魯菌病，其次為牛布魯菌病。

　　一、 生物學(xué)性狀

　　形態(tài)與染色

　　革蘭陰性小球桿菌或短桿菌。大小為0.4~0.8mm ×0.5~1.5mm。無芽胞，無鞭毛，光滑型菌有微莢膜。革蘭染色經(jīng)常著色不佳，故復(fù)染時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)至3min左右。

　　培養(yǎng)特性

　　需氧菌，牛布魯菌在初分離時(shí)需5%~10%CO2。營(yíng)養(yǎng)要求較高，在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)緩慢，如加入血清或肝侵液，或加硫胺、煙酸和生長(zhǎng)素等可促進(jìn)生長(zhǎng)。最適生長(zhǎng)溫度為35~37℃，最適pH為6.6~6.8。經(jīng)37℃ 培養(yǎng)48h可長(zhǎng)出微小、透明、無色的光滑型(S)菌落，經(jīng)人工傳代培養(yǎng)后可轉(zhuǎn)變成粗糙型(R)菌落。兩種菌落可用吖啶黃玻片凝聚試驗(yàn)鑒別，S型在1:1000的吖啶黃中呈均勻混濁，而R型菌出現(xiàn)凝塊。布魯菌在血瓊脂平板上不溶血，在液體培養(yǎng)基中可形成輕度混濁并有沉淀。

　　生化反應(yīng)

　　大多能分解尿素和產(chǎn)生H2S。根據(jù)產(chǎn)生H2S的多少和在含堿性染料培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況，可鑒別羊、牛、豬等三種布魯菌。

　　抗原構(gòu)造與分型

　　布魯菌含有兩種抗原物質(zhì)，即A抗原和M抗原。兩種抗原在不同的布魯菌中含量不同，牛布魯菌含A(abortus)抗原多，故又稱牛布魯菌抗原;羊布魯菌含M(melitensis)抗原多故又稱羊布魯菌抗原。兩種抗原量的比例不同可對(duì)菌種進(jìn)行區(qū)別，如牛布魯菌A:M=20:1，而羊布魯菌A:M=1:20，豬布魯菌A:M=2:1。用A與M因子血清進(jìn)行凝集試驗(yàn)可鑒別三種布魯菌。

　　抵抗力

　　抵抗力較強(qiáng)，在土壤、毛皮、病畜的臟器和分泌物、肉和乳制品中可生存數(shù)周至數(shù)月。但在濕熱60℃、20min，日光直接照射下20min可死亡;對(duì)常用消毒劑均較敏感，如3%來蘇作用數(shù)分鐘可殺死。對(duì)常用的廣譜抗生素也較敏感。

　　二 、 致病性與免疫性

　　致病物質(zhì)

　　布魯菌的主要致病物質(zhì)是內(nèi)毒素。莢膜與侵襲酶(透明質(zhì)酸酶、過氧化氫酶等)增強(qiáng)了該菌的侵襲力，使細(xì)菌能通過完整皮膚、粘膜進(jìn)入宿主體內(nèi)，并在機(jī)體臟器內(nèi)大量繁殖和快速擴(kuò)散入血流。

　　所致疾病

　　布魯菌感染家畜引起母畜流產(chǎn)，病原體可隨流產(chǎn)的胎畜和羊水大量排出;病畜還可表現(xiàn)為睪丸炎、附睪炎、乳腺炎、子宮炎等，隱性感染的動(dòng)物也可經(jīng)乳汁、糞、尿等長(zhǎng)期排菌，人類對(duì)布魯菌易感，主要通過接觸病畜及其分泌物或接觸被污染的畜產(chǎn)品，經(jīng)皮膚、粘膜、眼結(jié)膜、消化道、呼吸道等不同途徑感染。

　　布魯菌侵入機(jī)體經(jīng)1~6周的潛伏期，此期細(xì)菌被中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞吞噬，成為胞內(nèi)寄生菌，隨淋巴流達(dá)局部淋巴結(jié)生長(zhǎng)繁殖形成感染灶。當(dāng)細(xì)菌繁殖達(dá)一定數(shù)量，突破淋巴結(jié)而侵入血流，出現(xiàn)菌血癥。由于內(nèi)毒素的作用致患者發(fā)熱，隨后細(xì)菌進(jìn)入肝、脾、骨髓和淋巴結(jié)等臟器細(xì)胞，發(fā)熱也漸消退。細(xì)菌在細(xì)胞內(nèi)繁殖到一定程度可再度入血，又出現(xiàn)菌血癥而致體溫升高。如此反復(fù)形成的菌血癥，使患者的熱型呈波浪式，臨床上稱為波浪熱。感染易轉(zhuǎn)為慢性，在全身各處引起遷徙性病變，伴隨發(fā)熱、關(guān)節(jié)痛和全身乏力等癥狀，體征有肝、脾腫大。

　　人類感染布魯菌不引起流產(chǎn)，原因可能是易感動(dòng)物的生殖器官和胎膜上含有大量赤蘚醇，刺激細(xì)菌生長(zhǎng)而引起流產(chǎn)，而人類胎盤中不含有赤蘚醇，故不會(huì)引起流產(chǎn)。另外，布魯菌的致病與本菌引起的Ⅳ型超敏反應(yīng)有關(guān);還有菌體抗原成分與相應(yīng)抗體形成的免疫復(fù)合物，可導(dǎo)致急性炎癥和壞死，病灶中有大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，可能是一種Ⅲ型超敏反應(yīng)(Arthus反應(yīng))。

　　免疫性

　　機(jī)體感染布魯菌后可產(chǎn)生免疫力，且各菌種和生物型之間有交叉免疫。一般認(rèn)為此免疫力是有菌免疫，即當(dāng)機(jī)體內(nèi)有布魯菌存在時(shí)，對(duì)再次感染則有較強(qiáng)免疫力。但近來認(rèn)為隨著病程的延續(xù)，機(jī)體免疫力不斷增強(qiáng)，病菌不斷被消滅，最終可變?yōu)闊o菌免疫。由于布魯菌為細(xì)胞內(nèi)寄生，故其免疫以細(xì)胞免疫為主。病后機(jī)體產(chǎn)IgM和IgG型抗體，可發(fā)揮免疫調(diào)理作用。此外，細(xì)胞免疫和Ⅳ型超敏反應(yīng)所導(dǎo)致的免疫保護(hù)及病理損害，在慢性與反復(fù)發(fā)作的病程中往往交織存在。

　　三 、 微生物學(xué)檢查

　　標(biāo)本

　　血液是最常用的標(biāo)本，急性期血培養(yǎng)陽性率高達(dá)70%。骨髓在急性期、亞急性期病人均可分離陽性。病畜的子宮分泌物、羊水，流產(chǎn)動(dòng)物的肝、脾、骨髓等也可作為分離培養(yǎng)的標(biāo)本。

　　分離培養(yǎng)與鑒定

　　將標(biāo)本接種于雙相肝浸液培養(yǎng)基(液相為肝浸液的瓊脂斜面)置37℃、5%~10%CO2孵箱中培養(yǎng)。菌落大多在4~7d形成，若30d時(shí)仍無菌生長(zhǎng)可報(bào)告為陰性。若有菌生長(zhǎng)，可根據(jù)涂片染色鏡檢，CO2的要求，H2S產(chǎn)生，染料抑菌試驗(yàn)，玻片凝集等確定型別。

　　血清學(xué)試驗(yàn)

　　1.凝集試驗(yàn)：發(fā)病1~7d后血清中開始出出現(xiàn)IgM抗體，將患者血清作倍比稀釋，標(biāo)準(zhǔn)菌量為1×109個(gè)/ml，進(jìn)行玻片凝集試驗(yàn)，1:200有診斷意義。但當(dāng)效價(jià)≥1:100時(shí)應(yīng)重復(fù)進(jìn)行試管凝集試驗(yàn)，需要在37℃水浴16~20d后觀察結(jié)果，以1:200~1:400血清凝集者為陽性。用膠乳凝集試驗(yàn)可在6min內(nèi)判定結(jié)果，方法簡(jiǎn)易可靠。

　　2.抗球蛋白試驗(yàn)(Coomb試驗(yàn))：布魯菌感染患者常出現(xiàn)不完全抗體，需用Coomb試驗(yàn)才能檢出。在病程中凝集效價(jià)出現(xiàn)增長(zhǎng)者有診斷意義。

　　3.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)：一般發(fā)病3周后出現(xiàn)IgG抗體，由于此抗體能維持較長(zhǎng)時(shí)間，故對(duì)診斷慢性布魯菌病意義較大。此試驗(yàn)特異性高，試驗(yàn)結(jié)果以1:10為陽性。

　　皮膚試驗(yàn)

　　取布魯菌素(brucellin)或布魯菌蛋白提取物0.1ml作皮內(nèi)注射，24~48d后觀察結(jié)果.局部紅腫浸潤(rùn)直徑1~2cm者為弱陽性，>2~3cm為陽性，>3~6cm為強(qiáng)陽性。若紅腫在4~6d內(nèi)消退者為假陽性。皮試陽性可診斷慢性或曾患過布魯菌病。

　　四、防治原則

　　控制和消滅家畜布魯菌病，切斷傳播途徑和免疫接種是三項(xiàng)主要的預(yù)防措施。免疫接種以畜群為主，疫區(qū)人群也應(yīng)接種減毒活疫苗(104M株疫苗皮上劃痕接種)，有效期約一年。急性病人用抗生素治療，慢性者除繼續(xù)用抗生素治療外，應(yīng)采用綜合療法以增強(qiáng)機(jī)體免疫力，也可用特異性疫苗進(jìn)行脫敏治療。