1.下列可以作為自養(yǎng)微生物氮源的是( )
A.N2、尿素 B.牛肉膏、蛋白胨
C.尿素、酵母粉 D.銨鹽、硝酸鹽
解析:選D。自養(yǎng)微生物需要吸收的是自然界無機物,包括無機碳源和無機氮源。雖然N2可以被固氮菌直接利用,但是固氮微生物不屬于自養(yǎng)型微生物。
2.關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述錯誤的是( )
A.操作順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌
B.將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯
C.等培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右時進行倒平板
D.待平板冷卻凝固5~10 分鐘后將平板倒過來放置
解析:選A。制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板,不能顛倒。牛肉膏容易受潮,當牛肉膏溶化并與稱量紙分離后,用玻璃棒取出稱量紙。待培養(yǎng)基冷卻至50 ℃時,用手觸摸錐形瓶剛剛不燙手,并且培養(yǎng)基處于溶化狀態(tài)時進行倒平板。平板冷卻凝固(大約需5 min~10 min)后還需要倒置。
3.細菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理,這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌( )
A.接種針、手、培養(yǎng)基 B.高壓鍋、手、接種針
C.培養(yǎng)基、手、接種針 D.接種針、手、高壓鍋
解析:選C。此題考查學生對無菌技術(shù)的掌握。高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌的一個設備,通常用于培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法;鹧孀茻,可以迅速徹底地滅菌,適用于微生物的接種工具,如接種環(huán)。
4.(2011年臨沂高二檢測)能夠測定樣品活菌數(shù)的方法是( )
A.稀釋涂布平板法 B.直接計數(shù)法
C.重量法 D.比濁法
解析:選A。利用稀釋涂布平板法能夠在不影響生活的情況下將細菌個體從固體培養(yǎng)基上分離出來,并可以繁殖形成菌落,可根據(jù)菌落數(shù)測定樣品活菌數(shù)。
5.下列有關(guān)平板劃線接種法的操作錯誤的是( )
A.將接種環(huán)放在火焰上灼燒
B.將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液
C.蘸取菌液和劃線要在火焰旁進行
D.接種環(huán)劃線要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連
解析:選D。為了避免雜菌污染,蘸取菌液和劃線要在火焰旁進行;每次劃線之前都需灼燒滅菌,劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)。灼燒接種環(huán)之后,要冷卻后才能伸入菌液,以免溫度太高,殺死菌種。在平板劃線時不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。
6.(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮__________、__________和滲透壓等條件。由于該細菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、__________、__________等優(yōu)點,因此常作為遺傳學研究的實驗材料。
(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中,為防止雜菌污染,需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行__________(消毒、滅菌);操作者的雙手需要進行清洗和__________;靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅,其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能________________________________________________________________________。
(3)若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù),要想使所得估計值更接近實際值,除應嚴格操作、多次重復外,還應保證待測樣品稀釋的__________。
(4)通常,對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的__________。
(5)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(6)若用大腸桿菌進行實驗,使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過__________處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴散。
解析:(1)大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點,培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。
(2)滅菌使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,所以對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌,消毒使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物,操作者的雙手需要進行清洗和消毒,紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。
(3)稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進行培養(yǎng),應保證樣品稀釋的比例適合。
(4)對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的鑒定。
(5)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。
(6)因為有的大腸桿菌會釋放一種強烈的毒素,并可能導致腸管出現(xiàn)嚴重癥狀,使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴散。
答案:(1)溫度 酸堿度 易培養(yǎng) 生活周期短
(2)滅菌 消毒 損傷DNA的結(jié)構(gòu)
(3)比例合適
(4)鑒定(或分類)
(5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生
(6)滅菌