10.(14分)(2014·江蘇卷)為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物，先用植物外植體獲得愈傷組織，然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請回答下列問題：

　　(1)外植體經(jīng)誘導后形成愈傷組織的過程稱為________。

　　(2)在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時，細胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如圖所示。細胞干重在12 d后下降的原因有_______________________;培養(yǎng)液中蔗糖的作用是________、________。

　　(3)多倍體愈傷組織細胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細胞經(jīng)________處理，會產(chǎn)生染色體加倍的細胞。為檢測愈傷組織細胞染色體數(shù)目，壓片前常用纖維素酶和________酶解離愈傷組織。若愈傷組織細胞(2n)經(jīng)誘導處理后，觀察到染色體數(shù)為8n的細胞，合理的解釋是

　　___________________________________________________________、

　　___________________________________________________________。

　　(4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物，生產(chǎn)中采用植物細胞的固定化技術(shù)，其原理與酵母細胞固定化類似。下列說法正確的有________(填序號)。

　�、龠x取旺盛生長的愈傷組織細胞包埋

　�、诒仨氃诠庹諚l件下培養(yǎng)

　�、叟囵B(yǎng)過程中需通空氣

　�、芄潭ɑ�后植物細胞生長會變慢

　　解析　(1)離體的植物組織、器官或細胞經(jīng)誘導形成愈傷組織過程為脫分化過程。

　　(2)據(jù)圖可知，細胞在培養(yǎng)過程，逐漸消耗有機物，使蔗糖逐漸減少，同時溶液pH發(fā)生改變，均對細胞生長造成了影響。

　　(3)誘導染色體數(shù)目加倍常用的方法是秋水仙素處理和低溫處理，使紡綞體形成受阻從而染色體數(shù)目加倍。檢測染色體數(shù)目前，為便于制片觀察，常用纖維素酶和果膠酶去除植物細胞壁。二倍體細胞誘導加倍后含有四個染色體組，在該細胞進行有絲分裂到達后期時會出現(xiàn)八個染色體組。(4)愈傷組織培養(yǎng)過程中不需要光照條件。

　　答案　(1)脫分化

　　(2)蔗糖濃度下降，pH降低　提供能源　調(diào)節(jié)滲透壓

　　(3)秋水仙素(低溫)　果膠　經(jīng)加倍到4n的細胞處于有絲分裂后期　經(jīng)加倍到8n的細胞處于有絲分裂中期

　　(4)①③④

　　11.(15分)(2014·全國新課標卷Ⅱ)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作�；卮鹣铝袉栴}：

　　(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是____;然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液;經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37，據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________。

　　(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌，操作時，接種環(huán)通過________滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是__________________。

　　(3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。

　　(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高________的利用率。

　　解析　(1)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間，可依據(jù)是否產(chǎn)生菌落確定培養(yǎng)基的滅菌效果是否理想。由樣品中菌株數(shù)計算公式：(C÷V)×M知：1 mL水樣中菌株數(shù)為(38÷0.1)×100=3.8×104。故每升水樣中的活菌數(shù)為3.8×107。(2)利用接種環(huán)接種時，接種環(huán)需灼燒滅菌。利用平板劃線法分離細菌時，在第二次及以后劃線時，總是從上一次劃線的末端開始，可以將聚集的菌體逐步稀釋以便得到單個菌落。(3)稀釋涂布平板法是用涂布器將菌液均勻涂布在培養(yǎng)基表面，故培養(yǎng)后產(chǎn)生的菌落應隨機分布在培養(yǎng)基表面，即B表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)液體培養(yǎng)基通過振蕩可提高溶氧量，同時使菌體與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，從而提高細菌的生長速度。

　　答案　(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8×107

　　(2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落

　　(3)B

　　(4)溶解氧　營養(yǎng)物質(zhì)