14.顯微鑒定方法:a組織鑒定法 適于完整藥材。鑒別外形相似而組織構(gòu)造不同的樣品。
b粉末鑒定法 適于粉末狀或破碎藥材、含粉末的中成藥。鑒別具有不同細(xì)胞、內(nèi)含物或組織碎片的樣品。c顯微定量常數(shù)測定 適于葉類中藥,如柵表比、氣孔指數(shù)等?梢澡b別同屬不同種的樣品。d顯微化學(xué)鑒定法 適宜于含某種化學(xué)成分能與特定試劑產(chǎn)生特殊反應(yīng)的藥材。顯微化學(xué)反應(yīng):切片或粉末,加試劑后的顯色。黃連;顯微定位:確定化學(xué)成分存在的部位。柴胡。e顯微定量法 對一定重量單味藥粉末中某些顯微特征進(jìn)行數(shù)量分析,或測定中成藥中某方藥某個顯微特征百分含量的一種鑒定方法。常用方法:定重量法、定面積法、比率計數(shù)法。
15.顯微鑒別的描述:
組織結(jié)構(gòu):由外向內(nèi)依次為,表皮、皮層、中柱鞘、維管束(韌皮部、形成層、木質(zhì)部、射線) 與髓。
數(shù)據(jù)處理原則:<10mm帶小數(shù);>10mm為整數(shù);200mm以上的個位為0
粉末特征:依據(jù)先多數(shù)后少數(shù),先特殊后一般,先感觀后測試3條原則。
16.理化鑒定:是利用中藥中某些化學(xué)成分的物理、化學(xué)性質(zhì),通過物理、化學(xué)或儀器分析的手段來鑒定中藥的真實性、純度和品質(zhì)優(yōu)劣的方法。
17.理化鑒定的方法和原理:
a. 物理常數(shù)測定:包括相對密度、硬度、熔點、凝點、折光率、旋光度、黏稠度、沸點、膨脹度等。主要用于揮發(fā)油、油質(zhì)類、樹脂類、液體類、加工類、礦物類、制劑類等中藥的真?zhèn)魏图兌鹊蔫b定。
b. 微量升華:是利用中藥中所含的某些化學(xué)成分,在一定溫度下能夠升華的性質(zhì),在顯微鏡下觀察其升華物的形狀、顏色或加某些化學(xué)試劑觀察其化學(xué)反應(yīng)作為鑒別的特征。
c. 化學(xué)定性鑒別:利用所含的化學(xué)成分能與某些特定試劑作用,產(chǎn)生不同顏色或沉淀的反應(yīng)。方法:試管法或紙片法,直接在藥材表面、切片或粉末上進(jìn)行。
d. 化學(xué)定量分析:對中藥中具有中醫(yī)臨床療效的主要化學(xué)成分、或有效部位進(jìn)行含量測定,來控制中藥的質(zhì)量。方法:包括經(jīng)典分析法(重量法、容量法)、分光光度法、高效液相色譜法、氣相色譜法等。
e. 熒光分析:利用中藥中的某些化學(xué)成分,在紫外光或日光下能產(chǎn)生一定顏色的熒光性質(zhì)進(jìn)行鑒定。淡水珍珠——黃綠色熒光;海水珍珠——藍(lán)紫色熒光。
f. 分光光度法:通過測定物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)對光的吸收度,對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。常用波長:紫外光區(qū):200~400nm;可見光區(qū):400~850nm;紅外光區(qū):2.5~15mm;方法: ◆紫外分光光度法、可見分光光度法;◆紅外分光光度法、原子吸收分光光度法
g. 色譜鑒定法:又稱為層析法。是利用物質(zhì)在流動相與固定相兩相中的分配系數(shù)差異而被分離。根據(jù)色譜分離原理,分為:吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、空間排阻色譜。常用色譜鑒定法:◆薄層色譜法、 ◆氣相色譜法、 ◆高效液相色譜法、 ◆蛋白電泳色譜法、◆高效毛細(xì)管電泳法
h. 其他理化鑒定方法:
質(zhì)譜鑒定法:是按照帶電粒子的質(zhì)量對電荷的比值大小依次排列形成的圖譜。主要用于化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)鑒定。
核磁共振譜法:被認(rèn)為是中藥指紋鑒別最有前途的方法
色譜-光譜聯(lián)用分析法:用于成分、組分分離或含量測定
X射線衍射分析法:用于礦物類、粉末類藥材的分析、鑒定。
聚類分析法:應(yīng)用模糊數(shù)學(xué)原理和計算機(jī)技術(shù),將中藥的多種鑒別特征的主因子通過數(shù)學(xué)變換和數(shù)量化,進(jìn)行計算分析,或建立不同的動態(tài)聚類圖,來研究中藥信息鑒定模式。
熱分析法:用熱分析儀測量某些物質(zhì)及其反應(yīng)產(chǎn)物在程序控溫條件下,其物理性能的變化參數(shù)或熱圖譜來鑒別中藥。
18. 生物鑒定法包括:免疫鑒定法、細(xì)胞生物學(xué)鑒定法、生物效價測定法、DNA遺傳標(biāo)記鑒定法、mRNA差異顯示鑒定法。
19.中藥的常規(guī)檢測:包括水分測定、灰分測定、浸出物測定、揮發(fā)油含量測定等
20.水分測定:a烘干法:適用于不含或少含揮發(fā)性成分的中藥;b甲苯法:適用于含揮發(fā)性成分的中藥,包括:1減壓干燥法 適用于含有揮發(fā)性成分的貴重中藥;2氣相色譜法 適用于水分的極少的中藥;3紅外線干燥法 中成藥生產(chǎn)過程用,簡便。
灰分測定:a總灰分:中藥經(jīng)粉碎、加熱、高溫?zé)胱浦粱一鴼埩舻幕曳郑ㄉ砘曳趾屯鈦黼s質(zhì)。b酸不溶性灰分:將總灰分加10%鹽酸處理,得到不溶于10%鹽酸的灰分。
浸出物測定:適用于有效成分尚不清楚或有效成分尚無精確定量方法中藥的質(zhì)量評價。根據(jù)主要成分的溶解性質(zhì)確定溶劑。溶劑:水、一定濃度的乙醇或甲醇、乙醚。測定方法:冷浸法、熱浸法
揮發(fā)油含量測定:利用揮發(fā)油能與水蒸氣同時蒸餾的性質(zhì),在特制的揮發(fā)油測定器中測定其含量。
21.中藥的安全性檢測項目:有害物質(zhì)檢查、重金屬檢查、藥品微生物限量檢驗、熱源檢查、毒性試驗、刺激試驗、過敏試驗、對紅細(xì)胞影響試驗。
22.有害物質(zhì)檢測方法:黃曲霉毒素檢測、農(nóng)藥殘留量檢測、重金屬檢查、砷鹽檢查、氯化物的檢查等。
23.中藥指紋圖譜:
含義:是指某種或某產(chǎn)地的中藥材或中成藥中所共有的、具有特征性的某類或數(shù)類化學(xué)成分的色譜或光譜的圖譜。
特點:a通過圖譜的特征性有效地鑒別樣品的真?zhèn)位虍a(chǎn)地;b通過圖譜主要特征峰的面積或比例,有效地控制樣品質(zhì)量的相對穩(wěn)定。
研究內(nèi)容:名稱:
來源:原動植物、藥用部位、產(chǎn)地、采收加工、炮制方法等。
供試品的制備:根據(jù)所含成分的理化性質(zhì)和檢測方法,選擇適宜的制備方法。
參照物的制備:選擇適宜的對照品或內(nèi)標(biāo)物作為參照物。
檢測方法:根據(jù)所含成分的理化性質(zhì),選擇適宜的測定方法。
指紋圖譜及技術(shù)參數(shù):以10批次以上供試品的檢測結(jié)果所給出的相關(guān)參數(shù)為依據(jù)建立指紋圖譜。技術(shù)參數(shù)包括:共有峰的標(biāo)定,共有指紋峰面積的比值,非共有峰面積(<10%)等。