四、填空題(每空0.5分)

　　1.通過自動獲取或人為地供給外源______，使細(xì)胞或培養(yǎng)的受體細(xì)胞獲得新的______，這就是轉(zhuǎn)化作用。【DNA;遺傳表型】

　　2.由__________和__________介導(dǎo)的基因移位或重排，稱為轉(zhuǎn)座�！静迦胄蛄�;轉(zhuǎn)座子】

　　3.一個完整的基因克隆過程應(yīng)包括：目的基因的獲取，______的選擇與改造，_________和__________連接為重組DNA，重組DNA分子導(dǎo)入_________，篩選出含感興趣基因的重組DNA轉(zhuǎn)化細(xì)胞�！究寺≥d體;目的基因;載體DNA;受體細(xì)胞】

　　4.限制性核酸內(nèi)切酶是一類識別并水解_________________的核酸___________酶。

　　【雙鏈DNA特異序列;內(nèi)切】

　　5.科學(xué)家感興趣的外源基因又稱___________，其來源有幾種途徑：化學(xué)合成，酶促合成cDNA，制備的基因組DNA及_________技術(shù)�！灸康幕�因;PCR】

　　6.外源DNA離開染色體是不能復(fù)制的。將_______與______連接，構(gòu)建成重組DNA分子，外源DNA則可被復(fù)制。 【外源基因;載體DNA】

　　7.根據(jù)克隆載體性質(zhì)不同，將重組DNA分子導(dǎo)人細(xì)菌的方法有_______、________及感染�！巨D(zhuǎn)化;轉(zhuǎn)染】

　　五、名詞解釋題(每小題2分)

　　1.質(zhì)粒 【是存在于細(xì)菌染色體外的小型環(huán)狀雙鏈DNA分子。質(zhì)粒分子本身是含有復(fù)制功能的遺傳結(jié)構(gòu)，能在宿主細(xì)胞獨(dú)立自主地進(jìn)行復(fù)制，并在細(xì)胞分裂時恒定地傳給子代細(xì)胞。質(zhì)粒帶有某些遺傳信息，所以會賦予宿主細(xì)胞一些遺傳性狀。因為質(zhì)粒DNA有自我復(fù)制功能及所攜帶的遺傳信息等特性，故可作為重組DNA操作的載體。】

　　2.限制性核酸內(nèi)切酶 【就是識別DNA的特異序列，并在識別位點(diǎn)或其周圍切割雙鏈DNA的一類核酸內(nèi)切酶。限制性核酸內(nèi)切酶存在于細(xì)菌體內(nèi)，與相伴存在的甲基化酶共同構(gòu)成細(xì)菌的限制——修飾體系，限制外源DNA、保護(hù)自身DNA，對細(xì)菌遺傳性狀的穩(wěn)定遺傳具有重要意義。限制性核酸內(nèi)切酶分為三類。重組DNA技術(shù)中常用的限制性內(nèi)切核酸酶為Ⅱ類酶�！�

　　3.載體 【即基因載體，或稱克隆載體，是在基因工程中為“攜帶”感興趣的外源DNA、實(shí)現(xiàn)外源DNA的無性繁殖或表達(dá)有意義的蛋白質(zhì)所采用的一些DNA分子，具有自我復(fù)制和表達(dá)功能。其中，為使插入的外源DNA序列可轉(zhuǎn)錄,進(jìn)而翻譯成多肽鏈而特意設(shè)計的克隆載體又稱表達(dá)載體�？寺≥d體有質(zhì)粒DNA、噬菌體DNA和病毒DNA，它們經(jīng)適當(dāng)改造后仍具有自我復(fù)制能力，或兼有表達(dá)外源基因的能力。】

　　4.DNA克隆 【就是應(yīng)用酶學(xué)的方法，在體外將各種來源的遺傳物質(zhì)——同源的或異源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA與載體DNA結(jié)合成一個具有自我復(fù)制能力的DNA分子——復(fù)制子，繼而通過轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞、篩選出含有目的基因的轉(zhuǎn)化細(xì)胞，再進(jìn)行擴(kuò)增、提取獲得大量同一DNA分子，即DNA克隆，又稱基因克隆、重組DNA或基因工程�！�

　　5.目的基因 【應(yīng)用重組DNA技術(shù)有時是為分離、獲得某一感興趣的基因或DNA序列，或是為獲得感興趣基因的表達(dá)產(chǎn)物——蛋白質(zhì)。這些感興趣的基因或DNA序列就是目的基因，又稱目的DNA。目的DNA有兩種類型，即cDNA和基因組DNA�！�

　　6.同源重組 【發(fā)生在同源序列間的重組稱為同源重組，又稱基本重組。同源重組的發(fā)生依賴兩分子之間序列的相同或類似性。如果通過轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)獲得的外源DNA與宿主DNA同源，那么外源DNA就可以通過同源重組方式整合進(jìn)宿主染色體�！�

　　7.cDNA文庫 【以mRNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄酶合成與mRNA互補(bǔ)的DNA，即cDNA，再復(fù)制成雙鏈cDNA片段，與適當(dāng)載體連接后轉(zhuǎn)入受體菌。不同細(xì)菌包含了不同mRNA為模板的cDNA分子或片段，這樣生長的全部細(xì)菌所攜帶的各種cDNA分子或片段就代表了整個組織或細(xì)胞表達(dá)的各種mRNA信息，即cDNA文庫�！�

　　8.基因組DNA文庫 【利用限制性核酸內(nèi)切酶將染色體DNA切割成一定基因水平的許多片段，其中即含有人們感興趣的基因片段。將這些片段分于與適當(dāng)?shù)目寺≥d體拼接成重組DNA分子，繼而轉(zhuǎn)入受體菌，使每個細(xì)菌內(nèi)都攜帶一種重組DNA分子。不同細(xì)菌所包含的重組DNA分子可能為不同的染色體DNA片段，這樣全部轉(zhuǎn)化細(xì)菌所攜帶的各種染色體片段就代表了染色體的整個基因組。存在于轉(zhuǎn)化細(xì)菌內(nèi)、由克隆載體所攜帶的所有基因組DNA片段的集合稱基因組DNA文庫�；�因組DNA文庫涵蓋了基因組全部基因信息�！�

　　9.轉(zhuǎn)座 【在基因組內(nèi)有些基因可以從一個位置移動到另一位置。這些可移動的DNA序列包括插入序列和轉(zhuǎn)座子。由插入序列和轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的基因移位或重排現(xiàn)象稱為轉(zhuǎn)座�！�