參考答案

　　一、名詞解釋

　　1.是在生物化學(xué)及其相關(guān)學(xué)科應(yīng)用的各種技術(shù)。主要是指生物體內(nèi)物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物，特別是生物大分子

　　的分離、檢測(cè)、制備與改造技術(shù)。

　　2. 是在一定的條件下，用一定的溶劑處理樣品，使欲分離的物質(zhì)充分釋放到溶劑中的過程。又稱 “抽提”

　　或 “萃取”。

　　3. 是通過改變某些條件或加入某種物質(zhì)，使溶液中某種溶質(zhì)的溶解度降低，從而從溶液中沉淀析出的技術(shù)。

　　4. 低鹽濃度下蛋白質(zhì)的溶解度隨著鹽濃度的升高而增加的現(xiàn)象。

　　5. 鹽濃度升高到一定程度后，蛋白質(zhì)的溶解度隨著鹽濃度的升高而降低，結(jié)果使蛋白質(zhì)沉淀析出，這種現(xiàn)

　　象即為鹽析作用。

　　6. 是利用蛋白質(zhì)在 pI 時(shí)溶解度最低，以及不同的蛋白質(zhì)有不同的pI 這一特性，對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行分離純化的方法。

　　7. 利用不同蛋白質(zhì)在不同濃度的有機(jī)溶劑中的溶解度不同而使蛋白質(zhì)分離的方法稱為有機(jī)溶劑沉淀法。

　　二、填空：

　　1.高技術(shù)、高投入、高利潤(rùn) 2. 蛋白質(zhì)、酶、核酸、多糖、脂類 3. 沉淀分離技術(shù)、層析分

　　離技術(shù)、電泳分離技術(shù)、超離心分離技術(shù) 4. 存在的部位、分子結(jié)構(gòu)、溶解性質(zhì) 5.溶劑、溶解度、溫

　　度、pH 、濃度差 6. 鹽濃度、溫度、pH 值 7. 鹽析沉淀、等電點(diǎn)沉淀、有機(jī)溶劑沉淀 8. Ks 分段、

　　β分段 9.硫酸銨 10. 核糖、脫氧核糖到 11. tRNA 12. 稀鹽溶液提取、苯酚水溶液提取 13.蛋白

　　質(zhì)、DNA 、苯酚、RNA 、多糖、水層 14. 有機(jī)溶劑沉淀法、等電點(diǎn)沉淀法、鈣鹽沉淀法、選擇性溶劑

　　沉淀法 15. 異丙醇

　　三、問答題

　　1.進(jìn)行細(xì)胞破碎的方法主要有①機(jī)械破碎法：是通過機(jī)械運(yùn)動(dòng)所產(chǎn)生的剪切力的作用使細(xì)胞破碎的方法。

　�、谖锢砥扑榉ǎ河酶鞣N物理因素(溫度、壓力、超聲波) 的作用使細(xì)胞破碎的方法。③化學(xué)破碎法：用化

　　學(xué)試劑可使細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)改變或破壞，改變細(xì)胞膜的通透性。④酶學(xué)破碎法：通過加入酶或利用細(xì)胞本身

　　的酶的作用，使細(xì)胞破碎的方法。

　　2.①提取、分離方法條件要溫和使目的蛋白質(zhì)和酶的活性和功能不受損害②盡量盡早除去各種雜質(zhì)、脂

　　類、核酸及毒素。③設(shè)法除去變性的和不需要的蛋白質(zhì)。④設(shè)法提高目的蛋白質(zhì)的含量或生物活性。⑤

　　分離純化要在緩沖溶液中進(jìn)行。⑥建立靈敏、特異、精確的檢測(cè)方法。⑦根據(jù)其存在的部位、分子結(jié)構(gòu)

　　及溶解性質(zhì)的不同選擇不同的提取方法。

　　3.優(yōu)點(diǎn)：①它在水中溶解度大;②其溶解度受溫度的影響較小;③價(jià)廉易得;④不易引起蛋白質(zhì)變性;

　�、莘蛛x效果比其它鹽好。缺點(diǎn)：①緩沖能力差;②NH4+ 離子會(huì)干擾蛋白氮的測(cè)定。

　　4. ①防止核酸酶的降解: 在提取分離核酸時(shí)要降低核酸酶的活性，通常加入抑制劑和去激活劑。②防止

　　化學(xué)因素的降解: 避免強(qiáng)酸強(qiáng)堿。③防止物理因素的降解: 核酸大分子、高溫、機(jī)械作用等均可以破壞核

　　酸分子的完整性，因此核酸提取適于在低溫及避免劇烈攪拌等條件下進(jìn)行。