第十三節(jié) 重組DNA技術(shù)

　　一、A1

　　1、實驗室內(nèi)常用的連接外源性DNA載體DNA的酶是：

　　A、Taq酶

　　B、T4DNA連接酶

　　C、DNA聚合酶I

　　D、DNA聚合酶Ⅱ

　　E、DNA聚合酶Ⅲ

　　2、關(guān)于質(zhì)粒的敘述，下列哪項是錯誤的：

　　A、大小約為數(shù)千個堿基對

　　B、是雙鏈的線性分子

　　C、存在于大多數(shù)細菌的胞質(zhì)中

　　D、易從一個細菌轉(zhuǎn)移入另一個細菌

　　E、常帶抗藥基因

　　3、下列哪項不是限制性內(nèi)切酶識別序列的特點：

　　A、特異性很高

　　B、常由4～6個核苷酸組成

　　C、一般具有回文結(jié)構(gòu)

　　D、少數(shù)內(nèi)切酶識別序列中的堿基可以有規(guī)律地替換

　　E、限制性內(nèi)切酶的切口均是粘性末端

　　4、基因重組不包括

　　A、轉(zhuǎn)化

　　B、轉(zhuǎn)換

　　C、整合

　　D、轉(zhuǎn)導(dǎo)

　　E、轉(zhuǎn)位

　　5、重組DNA的連接方式不包括

　　A、粘性末端連接

　　B、平頭末端連接

　　C、粘性末端與平頭末端連接

　　D、DNA連接子技術(shù)

　　E、DNA適配子技術(shù)

　　答案部分

　　一、A1

　　1、

　　【正確答案】 B

　　【答案解析】 外源DNA片段和線狀質(zhì)粒載體的連接，也就是在雙鏈DNA5'磷酸和相鄰的3'羥基之間形成的新的共價鏈。如質(zhì)粒載體的兩條鏈都帶5'磷酸，可生成4個新的磷酸二酯鏈。但如果質(zhì)粒DNA已去磷酸化，則吸能形成2個新的磷酸二酯鏈。在這種情況下產(chǎn)生的兩個雜交體分子帶有2個單鏈切口，當雜本導(dǎo)入感受態(tài)細胞后可被修復(fù)。相鄰的5'磷酸和3'羥基間磷酸二酯鍵的形成可在體外由兩種不同的DNA連接酶催化，這兩種酶就是大腸桿菌DNA連接酶和T4噬菌體DNA連接酶。實際上在有克隆用途中，T4噬菌體DNA連接酶都是首選的用酶。這是因為在下述反應(yīng)條件下，它就能有效地將平端DNA片段連接起來。

　　【該題針對“重組DNA技術(shù)”知識點進行考核】

　　2、

　　【正確答案】 B

　　【答案解析】 質(zhì)粒是染色體外能夠進行自主復(fù)制的遺傳單位，包括真核生物的細胞器和細菌細胞中染色體以外的脫氧核糖核酸(DNA)分子。已發(fā)現(xiàn)有質(zhì)粒的細菌有幾百種，已知的絕大多數(shù)的細菌質(zhì)粒都是閉合環(huán)狀DNA分子(簡稱cccDNA)。

　　【該題針對“重組DNA技術(shù)”知識點進行考核】

　　3、

　　【正確答案】 E

　　【答案解析】 限制性內(nèi)切酶可分為兩大類，即I類酶和II酶。相當一部分酶(如EcoRI、BamHI、Hind等)的切口，作用點有180°旋轉(zhuǎn)對稱性，因而可形成粘性末端，但也有一些II類酶如BsuRI、BalI、HalIII、HPaI、SmaI等切割DNA分子并不產(chǎn)生粘性末端，而只形成平整末端。

　　【該題針對“重組DNA技術(shù)”知識點進行考核】

　　4、

　　【正確答案】 B

　　【答案解析】 基因重組只包括：接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)座。而基因轉(zhuǎn)換特指減數(shù)分裂過程中兩條染色體非同源DNA片段的轉(zhuǎn)移，不屬于基因重組。

　　【該題針對“重組DNA技術(shù)”知識點進行考核】

　　5、

　　【正確答案】 C

　　【答案解析】 重組DNA的連接包括下述內(nèi)容，其中不包括C。外源DNA片段和線狀質(zhì)粒載體的連接，也就是在雙鏈DNA5'磷酸和相鄰的3'羥基之間形成的新的共價鏈。粘端連接、平端DNA連接、質(zhì)粒載體中的快速克隆都是重組DNA的連接方式。

　　【該題針對“重組DNA技術(shù)”知識點進行考核】