腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)

　　【準(zhǔn)備】

　　1.個(gè)人準(zhǔn)備 穿好工作服，戴好口罩、帽子。

　　2.物品準(zhǔn)備 查看實(shí)驗(yàn)所需器材、試劑是否齊全，如不全，應(yīng)及時(shí)向工作人員提出。

　　3.本實(shí)驗(yàn)所需器材、試劑、試管、微量吸管、棉球、Neubauer計(jì)數(shù)板、蓋玻片、滴管、計(jì)時(shí)器、顯微鏡、冰醋酸。

　　【操作】

　　(一)細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)

　　1.充分混勻腦脊液標(biāo)本

　　2.用微量吸管吸取混勻的腦脊液，沖入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的上下2個(gè)計(jì)數(shù)池。

　　3.靜置2～3min。

　　4.低倍鏡下計(jì)數(shù)兩個(gè)計(jì)數(shù)池內(nèi)四角和中央大方格共10個(gè)大方格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)。

　　5.計(jì)算：細(xì)胞總數(shù)/L=N×106/L (N表示10個(gè)大方格內(nèi)的細(xì)胞總數(shù))

　　(二)白細(xì)胞計(jì)數(shù)

　　1.出去紅細(xì)胞：在小試管內(nèi)加入冰乙酸1～2滴，轉(zhuǎn)動(dòng)試管，使內(nèi)壁黏附有少量冰乙酸后傾去。

　　2.滴加混勻的腦脊液3～4滴，混勻，靜置5min，使紅細(xì)胞破壞。

　　3.充池：充分混勻。

　　4.用微量吸管吸取混勻后的稀釋腦脊液充入2個(gè)計(jì)數(shù)池。

　　5.計(jì)數(shù)：靜置2～3min待細(xì)胞沉降后。

　　6.低倍鏡下計(jì)數(shù)兩個(gè)計(jì)數(shù)池內(nèi)四角和中央大方格共10個(gè)大方格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)。

　　7.計(jì)算：白細(xì)胞總數(shù)/L=N×106/L (N表示10個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù))

　　【操作后】

　　1.關(guān)閉顯微鏡電源。

　　2.將使用過(guò)的一次性器材，剩余標(biāo)本置于污物桶中。

　　【注意事項(xiàng)】

　　1.應(yīng)準(zhǔn)確控制離心力及離心時(shí)間。

　　2.充池時(shí)需充分混勻標(biāo)本。充池應(yīng)一次完成，不可充液過(guò)多、過(guò)少或有氣泡產(chǎn)生。充池后不能移動(dòng)蓋玻片。