第一步：配制無菌馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)液和活化酵母菌液。

　　第二步：利用相同多套裝置，按下表步驟操作。

　　裝置編號 A B C D 裝置容器內(nèi)的溶液 無菌馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)液/mL 10 10 5 5 無菌水/mL - - 5 5 活化酵母菌液/mL 0.1 0.1 0.1 0.1 溫度(℃) 5 25 5 25 第三步：用血球計數(shù)板計數(shù)裝置中起始酵母菌數(shù)目，做好記錄。

　　第四步：將各裝置放在其他條件相同且適宜的條件下培養(yǎng)。

　　第五步：連續(xù)7天，每天隨機抽時間取樣計數(shù)，做好記錄。

　　回答下列問題：

　　(1)改正實驗操作步驟中的一處錯誤_______________________。(2)某同學第5天在使用血球計數(shù)板計數(shù)時做法如下：

　�、僬袷帗u勻試管，取1 mL培養(yǎng)液并適當稀釋(稀釋樣液的無菌水中加入了幾滴臺盼藍染液)。

　　②先將________放在計數(shù)室上，用吸管吸取稀釋后的培養(yǎng)液滴于其邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液________，制作好臨時裝片。

　　③顯微鏡下觀察計數(shù)：在觀察計數(shù)時只記________(被、不被)染成藍色的酵母菌。

　　(3)如所使用的血球計數(shù)板有16個中方格，每1個中方格中有25個小方格，每1個小方格容積為0.1 mm3(1 mL=1 000 mm3)。請推導出1毫升培養(yǎng)液中酵母菌細胞的計算公式：酵母細胞個數(shù)/mL=____________________________________________________________________________________________。

　　解析　(1)實驗中要注意遵循單一變量和對照原則，該實驗中要注意在每天同一時間取樣，否則由于時間不同而影響結(jié)果準確性。

　　(2)計數(shù)室的刻度一般有兩種規(guī)格，一種是一個大方格分成16個中方格，而每個中方格又分成25個小方格;另一種是一個大方格分成25個中方格;而每個中方格又分成16個小方格。但無論是哪種規(guī)格的計數(shù)板，每一個大方格中的小方格數(shù)都是相同的，即16×25=400個小方格。每一個大方格邊長為1 mm，則每一大方格的面積為1 mm2，蓋上蓋玻片后，載玻片與蓋玻片之間的高度為0.1 mm，所以計數(shù)室的容積為0.1 mm3。在計數(shù)時，通常數(shù)五個中方格的總菌數(shù)，然后求得每個中方格的平均值，再乘上16或25，就得一個大方格中的總菌數(shù)，然后再換算成1 mL菌液中的總菌數(shù)。(3)計數(shù)時，如果使用16格×25格規(guī)格的計數(shù)室，要按對角線位，取左上、右上、左下、右下4個中格(即100個小格)的酵母菌數(shù)。如果規(guī)格為25格×16格的計數(shù)板，除了取其4個對角方位外，還需再數(shù)中央的一個中格(即80個小方格)的酵母菌數(shù)。對每個樣品計數(shù)三次，取其平均值，按下列公式計算每1毫升菌液中所含的酵母菌個數(shù)。①16格×25格的血球計數(shù)板計算公式：酵母細胞數(shù)/mL=100個小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/100×400×104×稀釋倍數(shù)。②25格×16格的血球計數(shù)板計算公式：酵母細胞數(shù)/mL=80小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/80×400×104×稀釋倍數(shù)。答案　(1)第五步中應(yīng)每天同一時間(定時)取樣

　　(2)②蓋玻片　用濾紙(吸水紙)吸去�、鄄槐�

　　(3)平均每個小方格的酵母菌數(shù)×400×104×稀釋倍數(shù)