6.PCR技術(shù)有效地解決了因?yàn)闃悠分蠨NA含量太低而難以對樣品進(jìn)行研究的問題,而被廣泛應(yīng)用,此過程需要一種Taq DNA聚合酶。
請回答有關(guān)問題:
(1)體內(nèi)DNA復(fù)制過程中用解旋酶打開雙鏈DNA,而PCR技術(shù)中應(yīng)用_____________________________________________________________。
(2)Taq DNA聚合酶是從水生耐熱細(xì)菌Taq中分離的。
、贋槭裁碩aq細(xì)菌能從熱泉中被篩選出來呢?_____________________
_________________________________________________________________。
②Taq DNA聚合酶的功能是_______________________________________。
、跿aq DNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì),可用__________法和__________法進(jìn)行分離。
、転榱耸筎aq DNA聚合酶能夠多次反復(fù)利用,可采用__________技術(shù),常用的方法為________________________________________________________。
(3)從土壤中分離分解尿素的細(xì)菌時,應(yīng)采取的措施是__________,原因是____________________________________________________。
(4)相對于細(xì)菌分離,DNA分子的分離和提取操作要復(fù)雜的多。
在DNA提取中兩次用到蒸餾水,其目的分別是:________、__________。
實(shí)驗(yàn)中能否以哺乳動物成熟的紅細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料?為什么?______________________________________________________________。
(5)與體內(nèi)DNA復(fù)制相比較,PCR反應(yīng)要在__________中才能進(jìn)行,并且要嚴(yán)格控制__________條件。
(6)PCR中加入的引物有__________種,加入引物的作用是
______________________________________________________________。
答案 (1)高溫使DNA分子熱變性
(2)熱泉70~80的高溫條件淘汰了絕大多數(shù)微生物
催化脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵
凝膠色譜 電泳
固定化酶 化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法
(3)將細(xì)菌在培養(yǎng)基中培養(yǎng),其中唯一的氮源是尿素
只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長和繁殖
(4)使血細(xì)胞破裂,釋放出DNA分子
稀釋 NaCl溶液,使DNA分子析出
不能,哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中無DNA分子
(5)一定的緩沖溶液 溫度
(6)2 作為DNA復(fù)制的起點(diǎn)